Епізоотологічний моніторинг та удосконалення методів застосування біостимулятора ПДЕ для профілактики хвороб розплоду медоносних бджіл

Abstract

Дисертація на здобуття наукового ступеня кандидата ветеринарних наук за спеціальністю 16.00.03 – ветеринарна мікробіологія, епізоотологія, інфекційні хвороби та імунологія. – Національний університет біоресурсів і природокористування України, Київ, 2015. У дисертації подано результати епізоотологічного моніторингу за період 2003–2013 рр., визначено особливості нозологічного профілю заразних хвороб розплоду бджіл в умовах Північно-Східної України, встановлено залежність розвитку деяких хвороб від сезонів та природно-кліматичних умов. Запропоновано стимуляцію бджолосімей тканинним плацентарним препаратом ПДЕ, визначено його оптимальні концентрації, вивчено вплив на тривалість життя бджіл, нарощування розплоду, ступінь розвитку жирового тіла та цитологічні показники гемолімфи бджіл. Для оцінки впливу стимуляторів на організм бджіл удосконалено спосіб виготовлення мазків гемолімфи бджіл та їх візуалізації із застосуванням сучасних електронних засобів мікроскопії. Запропоновано модифікований спосіб застосування ПДЕ, що поєднує згодовування та розпилення препарату з цукровим сиропом та вивчено вплив цього способу на санітарно-гігієнічне очищення бджолосімей. За отриманими результатами теоретично і експериментально обґрунтовано методи раціональної стимуляції бджолосімей з використанням плаценти денатурованої емульгованої для профілактики заразних хвороб розплоду медоносних бджіл. Диссертация на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук по специальности 16.00.03 – ветеринарная микробиология, эпизоотология, инфекционные болезни и иммунология. – Национальный университет биоресурсов и природопользования Украины, Киев, 2015. В диссертации теоретически обобщена важность рациональной стимуляции в комплексной системе профилактических мер против заразных болезней расплода пчёл, что доказано эпизоотологическим мониторингом и определением нозологического профиля в Северо-Восточном регионе Украины за период 2003–2013 гг. Экспериментально обобщена эффективность влияния биостимулятора «Плаценты денатурированной эмульгированной» на формирование жизнеспособных пчелосемей и активизацию их санитарно-гигиенического поведения. Нозологический профиль и долевая часть болезней расплода в сравнительном аспекте Сумской и Черниговской областей сформирован гнильцовими болезнями расплода соответственно – 1 и 5 %; микозными болезнями расплода – 0 и 62 %; бактериальными болезнями имаго пчёл – 42 и 0 %; вароозом – 33 и 14 %; другими инвазионными болезнями имаго пчёл – 24 и 19 %, из них болезни расплода установлены в пределах от 1 до 67 %. Заболеваемость пчелосемей отдельных пасек Сумской и Черниговской областей некоторыми заразными болезнями пчёл в течение 10-летнего периода представлена такими показателями (в зависимости от сезонов): весна – 2,8 %; лето, перед медосбором – 20 %, после медосбора – 16,3 %; осень – 7,6 %, из них: варооз имаго – 37,33 %, гнильцовые болезни расплода – 26,26 % и микозные – 36,39 %. Впервые в Украине предложена стимуляция пчелосемей тканевым плацентарным препаратом ПДЭ, изучено его влияние на различные показатели жизнеспособности пчёл и пчелиных семей. Скармливание ПДЭ с сиропом при его разных концентрациях – 0,5; 1,0; 2,5; 5,0; 10 % не вызывало острой (3 суток) и хронической (25 суток) токсичности у пчёл. Продолжительность жизни пчёл в лабораторных условиях при разных концентрациях ПДЭ составила – 22,4–24,62 суток, из них максимальная – 24,62 суток при скармливании 1 % ПДЭ с сиропом. При применении сиропа с 1 % ПДЕ соответственно: 26,67±0,28 (p<0,05) суток; 0,2 % экстрактом элеутерококка – 23,39±0,16 суток, 1 % настойкой эхинацеи – 24,07±0,44 суток на фоне применения сахарного сиропа – 22,23±0,21 суток. Применение 1% ПДЭ с сахарным сиропом способствовало развитию жирового тела у пчёл до максимальной степени развития (4–5 баллов по Маурицио) весной у 38,2 % пчёл, осенью у 87,7 % пчёл, что на 23,2 и 13,3 % больше по сравнению с контрольными группами в соответствующие периоды. Анализ цитологических изменений гемолимфы пчёл на 8 и 21 сутки при применении ПДЭ и растительных стимуляторов по сравнению с контрольной группой показал увеличение количества пролейкоцитов и сферулоцитов, что свидетельствует об обновлении гемолимфы; уменьшение нейтрофильных и еозинофильных фагоцитов на 8 сутки с постепенным их увеличением на 21 сутки в группе с ПДЭ объясняет появление адаптационных механизмов в организме пчёл при применении стимуляторов с преимуществом для белкового препарата. Для качественной оценки влияния стимуляторов на организм пчёл впервые экспериментально проведено сравнение и усовершенствование методики изготовления мазков гемолимфы пчёл с применением современных электронных приборов визуальной диагностики. При этом рекомендуется минимизировать влияние внешних факторов на пчёл путём санации их тела этиловым спиртом не выше 40 % концентрации и отказом от эфирной анестезии при заборе гемолимфы для предупреждения изменений её клеток. Впервые предложена и экспериментально установлена потребность в дифференциации места отбора гемолимфы: для цитологического анализа её осуществляют путём декапитации пчелы; для изучения фагоцитарных особенностей клеток – с брюшка. Фиксацию мазков проводить в два этапа: при комнатной температуре в течение 30–60 мин с последующим их досушиванием перед инфракрасным обогревателем до прекращения липкости гемолимфы на стёклах не менее 5–10 мин; оптимальное время фиксации при использовании «Денатурата-К», метанола, 96 % этилового спирта составляет – 5 мин, спирт-эфира – 2 мин. Визуализация клеток гемолимфы при помощи цифровой насадки на микроскоп – камеры DELTA OPTICAL 2.0 МР позволяет качественно оценить цитологические изменения в гемоцитах пчёл, измерить размеры их клеток, используя компьютерную программу ToupView операционной системы Windows 2000/XP(SP2)/2003/Vista/2008. Разработанный модифицированный способ применения 1 % ПДЭ с сахарным сиропом совершается путём комбинированного его введения: скармливанием по 100 см3 на улочку пчёл и орошением с помощью прибора «Росинка» рамок для расплода, кормового мёда, пергой и способствует гигиенической очистке 95,3 % искусственно перфорированных ячеек через 24 часа в эксперименте, что отвечает высокому уровню их очищения; семьи, которые получали сахарный сироп без стимуляторов комбинированным способом имели средний уровень очистки – 90,3 %; семьи без применения подготовки – низкий уровень очистки – 79,7 %.